Понедельник, 20.11.2017, 11:41
| RSS
Главная | Каталог статей
Меню сайта
Категории раздела
статьи [155]
Нормативные документы Украины [45]
Нормативные документы Казахстана [4]
Накази Мінпраці та соцполітики [3]
Патенты [68]
Нормативные документы Российской Федерации [34]
клінічні протоколи лікування хвороб [19]
авторефераты диссертаций [4]
Нормативные документы Беларуси [21]
Нормативные документы СССР [19]
Полезные ресурсы
Мир лаборатории
Медицинский форум
МедЛабДиагностика
Туберкулез предстательной железы
Каталоги
Яндекс цитирования Рейтинг@Mail.ru
Статистика
Клиническая лабораторная диагностика
Главная » Статьи » статьи

ИССЛЕДОВАНИЕ ВЗАИМОСВЯЗИ УРОВНЯ АПОПТОЗА БОЛЬНЫХ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
Злокачественные новообразования молочных желез занимают лидирующее место в структуре онкологических заболеваний женщин. Иммунная система организма, как основная составляющая защитного комплекса "свое" против "чужого", подвергается негативному воздействию злокачественного новообразования. Действие опухоли на иммуноциты характеризуется как количественными, так и качественными (нарушением функциональной активности иммуннокомпетенных клеток, характерной для более ранних сроков заболевания) изменениями. Последняя характеризуется изменением в уровне CD95-экспрессирующих клеток периферической крови, маркеров активационного апоптоза, пролиферативной способностью клеток, цитокин-продуцирующей активностью [3]. Количественные потери описываются размерами клеточной гибели, в первую очередь количеством вступивших в апоптоз мононуклеаров периферической крови. Проведение лечебных мероприятий, таких как химиотерапия, вносят дополнительный вклад в нарушение функционирования системы иммунитета.
Целью исследования было выявление изменений показателей активации и гибели иммунокомпетентных клеток периферической крови больных РМЖ до и после проведения неоадьювантной химиотерапии (НХТ) и в сравнении с контрольной группой.
 В исследование была включена 71 женщина с диагнозом рака молочной железы со степенями развития заболевания T1-4N0-2M0, прошедшая 2 курса НХТ. Диагноз верифицирован морфологически. Контрольную группу составили 15 практически здоровых человек. Материалом для исследования служила венозная кровь, взятая из локтевой вены, утром натощак. Мононуклеары периферической крови (МНПК) выделяли стандартным методом на градиенте плотности фикколл-урографина (р=1,077 г/см). Пролиферативную активность оценивали с помощью реакции бласттрансформации (РБТЛ) по Хоробрых в спонтанном и стимулированном с ФГА и ЛПС вариантах [2]. Количество CD95-позитивных клеток оценивали иммунохимическим методом с использованием мышиных моноклональных антител производства "Novocastra Laboratories Ltd"(Финляндия) [4]. Продукцию Ил-4 и Ил-2 в супернатантах мононуклеаров периферической крови определяли с помощью иммуноферментного метода с использованием тест-систем "Цитокин" (Санкт-Петербург). Уровень апоптоза МНПК определяли флуоресцентным методом с использованием прижизненного ядерного красителя Hoechst 33342 (Щвеция)[5].
Результаты, полученные в ходе исследования, отражены в таблице 1

Таблица

*-достоверное различие показателей контрольной группы до проведения НХТ по сравнению с контрольной (р<0,05); **-достоверное различие показателей между группами до и после НХТ (р<0,05)

 

Контрольная группа              (n=15)

 

Пациенты с РМЖ

до НХТ (n=71)

Пациенты с РМЖ

 после НХТ

               (n=65)   

Уровень апоптоза в %

19,43± 3,36

29,64± 1,9*

33,79± 2,8

Уровень CD95+ клеток в %

17,13± 3,60

24,22± 3,45*

16,33± 4,70**

 РБТЛ сп. в имп/мин

1903,38± 323,40

3645,64± 400,80*

4395,05± 404,0

РБТЛ стим. ФГА в имп/мин

41219,78± 1733,60

32245,68± 754,90*

21719,22± 5356,89**

РБТЛ стим. ЛПС в имп/мин

3616,33±60,52

6306,33±127,51*

4418,90±298,76**

          Индекс стимуляции ФГА

14,34± 4,38

12,32± 2,0

8,84± 1,2

           Индекс стимуляции ЛПС

1,24±0,08

2,02±0,12*

1,61±0,30

  ИЛ-4 сп. в пг/мл

3,96± 0,50

9,94 ± 1,4*

15,91± 2,40**

ИЛ-4 стим. в пг/мл

1,26± 1,2

13,54± 3,3*

20,32± 5,6

ИЛ-2 сп. в пг/мл

36,99±7,65

2,92± 0,40*

13,06± 0,6**

   ИЛ-2 стим. в пг/мл

83,41±6,39

3,08±0,56*

0,00


У пациентов с РМЖ наблюдается достоверное увеличение доли вступивших в апоптоз МНПК, что можно связать с реализацией программы активационной клеточной гибели опосредованной экспрессией CD95-рецептора. Так как было выявлено статистически достоверное повышение количества СD95+-клеток. Пролиферативный МНПК потенциал у исследуемых с диагнозом РМЖ сохранен. Однако, при дополнительной стимуляции ФГА, выявляется снижение пролиферативных резервов относительно клеточного звена иммунитета, при этом данный параметр, характеризующий гуморальный ответ ожидаемо возрастает, что можно объяснить преимущественным воздействием злокачественного клона на Т-звено иммунной системы. Эти данные согласуются с повышением уровня продукции Ил-4, характеризующей гуморальную составляющую, и снижением продукции Ил-2, отражающей сохранность клеточного иммунитета. После проведения НХТ количество вступивших в апоптоз клеток по сравнению с показателями пациентов до проведения химиотерапии не изменяется. Но достоверно повышается количество CD95-экспрессирующих клеток, отвечающих за активационный апоптоз. Способность к спонтанной пролиферации МНПК после НХТ сохранена. Воздействие митогенов как клеточного, так и гуморального звеньев выявляют исчерпание пролиферативных резервов обеих составляющих. Наряду с этим продукция Ил-4 и Ил-2 достоверно повышается, что характеризует состояние анергии, когда иммунокомпетентные клетки обладают способностью к продукции цитокинов, но не могут на них реагировать [1].
Злокачественное новообразование молочной железы влияет на клеточную составляющую иммунной системы, что проявляется увеличением уровня запрограммированной гибели и количества готовых вступить в апоптоз МНПК, а также снижением пролиферативных резервов относительно Т-звена и продукции Ил-2. Проведение химиотерапии вызывает более глубокое исчерпание пролиферативных резервов клеточного иммунитета и влияет на пролиферативную активность гуморального, что сопровождается повышением продукции цитокинов, формированием состояния анергии. Полученные данные предполагают более детальное исследование мишеней иммунотерапевтического воздействия до и после проведения противоопухолевого лечения.

 

Список литературы:
1.    Апоптоз и анергия Т-клеток в патогенезе иммунной недостаточности при гнойно-септической паталогии / Е. Р. Черных, О. Ю. Леплина, М. А. Тихонова и др. – Новосибирск : издательство НГУ, 2004. – С. 184-191.
2.    Методы постановки реакции бласттрансформации в микроидентификации / В. В. Хоробрых, А. В. Пролин, А.Ф. Киркин и др. // Иммунология. – 1983. - №3. - С. 76 – 79.
3.    Параметры системы иммунитета у больных раком молочной железы с благоприятным и неблагоприятным исходом / Н. Н. Бабышкина, Н. В. Чердынцева, Е. М. Слонимская и др. // Материалы седьмого Российского онкологического конгресса / Санкт-Петербургский государственный университет. – Спб, 2003. – С. 116 – 118.
4.    Стандартизация методов иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга / А. А. Тотолян, Н. А. Болодуева, Л. Н. Бубнова и др. // Иммунология. – 2002 - № 1. – С. 44 – 48.
5.    Stridh, H. Apoptosis resistant bronchoalveolar lavage fluid lymphocytes in sarcodois / H. Stridh // Thorax. – 2002. №5. – Р. 897 – 901.

Просмотров: 846
Холодняк Любовь Владимировна
Хостинг от uCoz@Холодняк Любовь Владимировна